| 生物化学与分子生物学实验教程 |
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作者：佚名 文章来源：本站原创 点击数： 更新时间：2006-10-6 15:12:43  |
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简介
本教材的主要内容包括理论和实验两部分。其中理论部分系统、简要地介绍了生物化学与分子生物学的主要技术理论，包括分光光度技术、电泳技术、层析技术、离心技术、透析技术和分子生物学基本技术；实验部分由25个实验项目组成，根据不同的教学目标，本着“由浅入深、循序渐进”的原则，将实验内容组合为基本教学实验、基本技术实验、综合实验和分子克隆技术基础实验。实验内容可根据不同教学层次和对象酌情选用。本教材还包括几个附录内容，收载了生物化学与分子生物学常用数据及资料，供学习工作中查阅参考。
目录
第一章生物化学实验基本方法1
第一节实验室规则1
第二节基本实验操作1
一、玻璃仪器的清洗1
二、玻璃仪器的干燥2
三、刻度吸管的使用2
四、可调式微量移液器的使用3
五、溶液的混匀3
第三节常用实验仪器的使用4
一、LD52A离心机的使用4
二、722型分光光度计的使用方法4
三、752紫外光栅分光光度计的使用方法5
第四节常用实验标本的制备6
一、血液样本的收集与保存6
二、尿液样本的收集与保存6
三、组织样品的制备7
第五节实验报告的书写9
第二章生物化学基本实验技术10
第一节分光光度技术10
一、基本原理10
二、分光光度计的结构12
三、分光光度技术的应用13
第二节电泳技术14
一、基本原理14
二、电泳技术的分类和特点16
三、影响电泳的因素16
四、常用电泳技术17
第三节层析技术19
一、基本原理19
二、层析法的分类20
三、离子交换层析21
四、凝胶层析25
五、亲和层析31
六、高效液相色谱35
七、分配层析36
第四节离心技术39
一、基本原理39
二、离心机的类型40
三、制备性超速离心的分离方法41
四、离心操作的注意事项43
第五节透析技术43
一、透析原理及影响因素43
二、透析技术的应用44
三、透析操作及注意事项44
第三章分子生物学基本技术原理46
第一节核酸分子杂交46
一、核酸分子杂交的基本理论46
二、核酸探针47
三、核酸探针的标记48
四、核酸分子杂交的种类与方法50
第二节DNA克隆技术基本原理53
一、获取目的基因53
二、构建基因载体54
三、限制性核酸内切酶的作用56
四、DNA分子重组56
五、重组DNA分子导入宿主细胞57
六、阳性重组体的筛选和鉴定58
七、克隆基因的表达58
第三节聚合酶链反应（PCR）59
一、基本原理与方法59
二、PCR技术的应用61
第四章基本教学实验63
实验一蛋白质的沉淀、变性及等电点的测定63
一、蛋白质的沉淀与变性63
二、蛋白质沉淀反应的分类63
三、沉淀蛋白质的主要方法63
四、蛋白质等电点的测定66
实验二几种理化因素对酶活性的影响67
实验三琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用69
实验四运动对尿中乳酸含量的影响71
实验五酮体的生成和利用73
实验六血清丙氨酸氨基转移酶活性测定(赖氏法)75
第五章基本技术实验78
实验七蛋白质的透析78
实验八蛋白质的定量测定(一)：酚试剂法(改良Lowry法)79
实验九蛋白质的定量测定（二）：紫外分光光度法82
实验十血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳83
实验十一血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳86
实验十二SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子质量88
实验十三离子交换层析法分离氨基酸92
实验十四血清HDL胆固醇的测定94
实验十五胡萝卜素的柱层析分离95
实验十六细胞核的分离与纯化97
第六章综合实验101
实验十七激素对血糖浓度的影响101
一、血糖的定量测定101
二、胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响103
实验十八血清γ球蛋白的分离、纯化及鉴定105
实验十九核酸的制备及测定108
第七章分子克隆技术基础实验113
实验二十DNA的琼脂糖凝胶电泳113
实验二十一质粒DNA的提取（碱裂解法）114
实验二十二限制性内切酶对质粒DNA的酶切作用116
实验二十三感受态细菌的制备及质粒DNA的转化118
实验二十四核酸的分子杂交119
实验二十五聚合酶链反应（PCR）体外扩增DNA121
附录生物化学与分子生物学常用资料124
附录Ⅰ化学试剂分级及注意事项124
一、一般化学试剂的分级124
二、试剂配制的一般注意事项124
附录Ⅱ常用缓冲液配制表125
附录Ⅲ分子生物学实验中常用试剂的配制127
一、有机试剂的配制127
二、细菌培养基和抗生素的配制127
三、分子生物学实验中常用缓冲液的配制128
四、常用电泳缓冲液的配制129
五、常用凝胶加样缓冲液的配制129
六、常用限制性内切酶的酶切位点及其缓冲液的配制130
附录Ⅳ溴化乙锭稀溶液（如含有05μg/ml的电泳缓冲液）的净化处理130
附录Ⅴ细菌的保存130
附录Ⅵ重铬酸洗液的配制与再生131
附录Ⅶ常用的生物化学与分子生物学相关网站131
参考文献133
作者：李林、张悦红 主编 丛书名：高等医药院校实验课程教材
开本：16 装帧：平 书号：7-5025-9018-8
出版日期：2006年7月 版次： 1版1次 页数：144页
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| 文章录入：wktl 责任编辑：wktl |
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