| 双氢青蒿素的制备及其含量测定 |
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作者：佚名 文章来源：本站原创 点击数： 更新时间：2006-7-3 22:52:27  |
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青蒿索(Artexnislnine)是从中药青蒿又称黄花蒿(Artemlsiaannua1)中提取而得，是抗疟疾的有效成分⋯．具有过氧桥的新型倍半萜内酯的结构。青蒿索经还原后得到双氢青蒿索，其疗效优于青蒿索。我们对青蒿索经还原法制备双氢青蒿素进行了实验性探讨．目的是为工业化生产提供科学依据。现将实验结果报道如下。
1 仪器、试剂及材料
751型分光光度计(上海分析仪器厂)，wC一1型显徽熔点测定仪(四川大学科仪厂)．6511型电动搅拌机调速器(上海地理模型厂)．反应瓶(自制)，TG328B型分析天平(上海精科天平厂)。
乙醇、乙酸、硼氢化钾、丙酮．所甩试剂均为分析纯。双氢青蒿索标准品(gt氢青蒿索用丙酮反复重结晶3次，干燥至恒重．mP146 147℃，由本院应用化学研究室提供)．青蒿叶采自百色市。
2 实验方法与结果
2.1 青蒿索的提取
称取青蒿叶粗粉500g，置圆底烧瓶中，用5倍置的120号溶剂油回流提取3拔，每次2h，合并提取藏，减压浓缩．回收溶荆油至原体积的1／5．放置过夜，滤取粗晶体．用20倍盈70％乙醇将粗晶体加热溶解．加入I／10盈的活性炭．煮沸5mir,，趁热过谴。所得结晶再用20倍量70％乙醇重结晶．干燥即得青蒿索。
2．2 双氢青蒿索的翩备
2．2．1 青蒿索还原反应
青蒿索是具有过氧桥的新型倍半萜内醢结构．经硪氢化钾还原而产生的半缩醛化合物．即双氢青蒿索．其反应如下：
2．2．2 操作步骤分别称取青蒿索10g、15g、20g于反应瓶中，加20倍置的乙醇，徽热溶解，冷却．在不断搅拌下，加入还原剂硼氢化钾(先用少量水溶解硼氢化钾)．继续搅拌．使其反应2h。用酸谓节pH=7，再加入等量的饱和食盐水．继续搅拌1．5h．滤取析出物，用丙酮重结晶，结果见表1。
2．3 双氢青蒿索含量测定
2．3．1 标准曲钱及回归方程
参照文献准确称取双氢青蒿索标准品10．0mg．置50rid容量瓶中．加入乙醇溶解并稀释至刻度，放置2ho准确吸取标准溶液0．25、0．50、1．O0、1．50、2．00丌d分别置于lOml容量瓶中．不足2ml者，用乙醇准确补充至2m1．播匀。加入2％NaOH溶液至刻度．充分播匀。放入6O℃水灌恒温反应0．5h，取出冷却。 2％NaOH溶液一乙醇(4：1)为空白．在波长为238nm处．测定吸光度。绘制吸光度一浓度标准曲线，并计算回l目方程及相关系数。见表2。取氢青蒿索谁度在5-40mg／L范围其吸光度～ 谁度曲线呈线性．直线回归方程 =0．0028 3．2677x．相关系数r=0.9996。
2 3 2 样品测定
准确称取双氢青蒿索样品10mg．置50ml窖盈瓶中，加入乙醇溶解并稀释至刻度．播匀后静置2h。准确吸取样品溶液1．0ml置10ml容量瓶中，用乙醇补足2ml，播匀．加入2％NaOH溶液至刻度．充分播匀。放入60℃水灌恒温反应0．5h．取出冷却至室温。 2％NaOH溶液一乙醇(4：1)为空白，在238nm波长处测定吸光度．根据直线回归方程 =0 0028+3．2677x．计算出样品中双氢青蒿索的百分音量为99．33％
3 讨论
3．1 影响青蒿索还原反应的因索
还原剂的用置、反应温度、反应时间、溶剂的用量、盐析程度和pH值都是影响反应的因素。其中还原剂的用量、反应温度和反应时同是主要固素。
3．1．1 还原剂的用量
还原荆的用量是决定着反应是否完全和双氢青蒿索收率的高低。在其它反应条件不改变的情况下．我们对还原荆用量进行对比实验．还原剂与青蒿素用量之比从1：5开始到1：1终止，共做了5千不同比例的实验 结果表明．还原剂与青蒿索用量之比为1：1较佳。低于这个比例，反应不完全．收率偏低。高于这个比例．反应后硼氢化钾剩余．造成还原剂浪费，成本偏高。在加入硼氢化钾时，先用少量水将其溶解．而不是直接加入固体硼氢化钾．这既能使硼氢化钾完全溶解．又能加快反应均匀进行．提高还原荆的利用率。
3．1．2 反应温度的选择对于青蒿索还原反应来说．温度是关键的因素．温度偏高，反应物和生成物易于分解．收率偏低．而反应温度太低．反应速度慢。所以对氢化反应这一步来说．一定要控制好反应温度，一般反应温度应低于室温。
3．1．3 反应时I司的选择青蒿索还原反应可分为两十阶段．一是氢化阶段．即青蒿索与还原剂反应阶段；二是盐析阶段+即加盐进行盐析阶段。对于氢化阶段，经实验结果表明，这个阶段一般需要2h，时间太短，反应不完全，收率偏低。盐析阶段一般需要1．5h，时问太短．盐析不彻底．同掸会影响产率。所以这两十阶段的时间定为3．5h较为合适。
3.2 由于双氢青蒿索在乙醇溶液中是以n和日体平衡状态存在。因此．配制标准或样品溶液需要一定的稳定时间。实验结果表明．溶液配制后立即进行反应，其吸光度会偏高或偏低。放置2h后，再进行反应．结果稳定。因此．标准溶液和样品溶渣配制后需放置2h后．摇匀再加碱进行反应
3.3 双氢青蒿素乙醇藩渡和2％NaOH溶渣在6O℃水潜恒温中反应0.5h后，在波长238ran和290nm处产生两千吸收峰．其中238nm吸收峰灵敏高．可用于测定双氢青蒿索的含盈。但Na0H溶液的浓度应为2％，如果Na0H溶液的浓度大于或小于2％时，测定结果不准确。因此．从反应速度，反应稳定性和获得较大的吸光度来看．碱浓度以2％为佳。
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